Kể từ khi Peter Parker rời bỏ Mary Jane Watson hồi đó, đã hai năm trôi qua nhưng cảm xúc lằng nhằng trong trái tim anh vẫn chưa mời tan đi. Anh vẫn mơ mộng về tình yêu vĩ đại với Mary Jane, nhưng đồng thời cũng nhận ra trách nhiệm của mình với tư cách là Người Nhện, phải đối mặt với những thử thách mới. Anh phải cân bằng giữa cuộc sống siêu anh hùng và cuộc sống sinh viên đại học, cố gắng tránh bị phơi bày danh tính và bảo vệ những người anh yêu quý. Nhưng mọi chuyện trở nên phức tạp hơn khi một kẻ thù mạnh mẽ với tên gọi Octopus hay "Doc Ock" xuất hiện, đe dọa tới sự an toàn của cả thành phố. Trong khi đó, mối quan hệ với Mary Jane cũng lúc nào cũng đầy rẫy khó khăn và sức hút, khi cô buồn bã với sự thúc ép để tiết lộ bí mật của Người Nhện và công khai tình yêu của họ. Những mối quan hệ đặc biệt của Peter không chỉ dừng lại ở Mary Jane, mà còn ảnh hưởng đến mối quan hệ với người bạn thân nhất, Harry Osborn. Mối thù truyền kiếp giữa hai người không chỉ gây rạn nứt cho tình bạn mà còn đẩy họ vào cuộc chiến không khoan nhượng. Để bảo vệ mọi người và giữ cho tình yêu của mình không bị phai nhạt, Peter buộc phải đối mặt với những thử thách khó khăn và quyết đoán đứng lên chống lại kẻ thù để bảo vệ cả thành phố và những người anh yêu.